مواد و روشها تازه های تحقیق جداسازی مخمرها جداسازی و شناسایی شدند که عبارتند

Transcription

1 DOI: /jbioc کنترل بیلژیک آفات بیماریهای گیاهی درۀ 7 شمارۀ 1 بهار تابستان )1-7( 1397 بررسی اثر بیکنترلی مخمرهای آسکمیستی جداسازی شده از منابع طبیعی بر قارچ عامل بیماری کپک خاکستری cinerea( )Botrytis با رش کشت متقابل 3 *2 1 مجید قرایی صمد جمالی سعید عباسی 1. دانشجی کارشناسی ارشد دانشگاه رازی 2. استادیار قارچشناسی دانشگاه رازی 3. دانشیار بیماریشناسی گیاهی دانشگاه رازی )تاریخ دریافت: 95/11/19- تاریخ پذیرش: 96/04/04( چکیده به منظر کنترل زیستی بیماری کپک خاکستری که یکی از بیمارگرهای مهم پس از برداشت بهیژه در میه سیب تتفرنگی است از 14 جدایه مخمر استفاده شد. جدایهها از منابع طبیعی گیاهان جداسازی شده پس از شناسایی ملکلی برای ارزیابی اثر بیکنترلی علیه Botrytis cinerea در قالب طرح کامال تصادفی با سه تکرار به رش کشت متقابل ری محیط کشت سیبزمینی دکسترز آگار مرد Galactomyces candidum Candida Pichia sp. Pichia galeiformis Zygoascus meyerae Pichia kudriavzevii Saccharomyces cerevisiae استفاده قرار گرفتند. این مخمرها شامل: Meyerozma guilliermondii Lecythophora sp. Candida boidinii Metschnikowia sp. parapsilosis Candida catenulatea بدند که بیشترین تاثیر در بازدارندگی را گنه Galactomyces candidum با 47/85 درصد کمترین تاثیر را گنه Pichia kudriavzevii با 6/53 درصد داشت. نتایج نشان داد که اکثر مخمرهای آسکمیستی شناسایی شده قدرت کنترلکنندگی این بیمارگر را با درصدهای مختلف از هفت تا 48 داشتند. اژههای کلیدی: مهار زیستی شناسایی ملکلی ناحیه D1/D2 زیراحد بزرگ دی.ان.ای. ریبزمی یابی. Effects of biocontrol activity of ascomycetes yeasts isolated from natural resources on grey mold fungus (Botrytis cinerea) using dual culture method Majid Gharaei 1, Samad Jamali 2* and Saeed Abbasi 3 1. MS student, College of Agriculture, Razi University, Kermanshah, Iran; 2. Assistant Professor of Mycology, College of Agriculture, Razi University, Kermanshah, Iran; 3. Associate Professor, College of Agriculture, Razi University, Kermanshah, Iran. (Received: February 7, Accepted: June 25, 2017) ABSTRACT The grey mold disease caused by Botrytis cinerea is one of the most important post-harvest diseases especially in apple and strawberry. In order to biological control of B. cinerea, we used 14 isolates of ascomycetous yeasts obtained from natural resources and plants, as well For molecular identification of yeast isolates, genomic DNA extracted and D1/D2 domain of the large subunit (LSU) rdna gene sequenced. Nine species including Pichia kudriavzevii, Pichia galeiformis, Galactomyces candidum, Meyerozma guilliermondii, Saccharomyces cerevisiae, Zygoascus meyerae, Pichia sp., Candida parapsilosis, Metschnikowia sp., Candida boidinii, Lecythophora sp. and Candida catenulatea were identified based on sequence similarity of D1/D2 domain of the LSU rdna gene of the isolates with those in NCBI database. The dual culture method used for assay of their biocontrol activity against of B.cinerea on potato dextrose agar medium in a completely randomized design with tree replications. Our results showed that the highest inhibiting effect was related to G. candidum with percent and the lowest effect occarad by P. kudriavzevii with 6.53 percent. In this study, all yeasts isolates from natural resource and plants showed considerable biocontrol activity against B. cinerea. Key words: Biological control, Molecular identification, D1/D2 domain of the large subunit (LSU) rdna gene * Corresponding author jamali454@yahoo.com

2 قرایی همکاران: بررسی اثر بیکنترلی مخمرهای آسکمیستی جداسازی شده از منابع طبیعی بر... 2 تازه های تحقیق در این تحقیق از ماد طبیعی جداسازی شناسایی شدند که عبارتند مخمرهای مفیدی Pichia از: Galactomyces Pichia galeiformis kudriavzevii Meyerozma guilliermondii Zygoascus meyerae Metschnikowia.Lecythophora sp. candidum Saccharomyces cerevisiae Candida parapsilosis Pichia sp. Candida boidinii sp..candida catenulatea تاثیر مخمرهای شناسایی شده مذکر در اثر بیکنترلی قارچ عامل کپک خاکستری مرد ارزیابی قرار گرفت که تمام جدایه ها در کنترل این بیمارگر مثر بدند. گنه G. candidum بیشترین کمترین در تاثیر تاثیر بازدارندگی گنه را را P. ( 6/53 درصد( داشت. kudriavzevii کپک بیماری خاکستری مقدمه عامل قارچی با Pers.: Fr. Botrytis cinerea یکی از مهمترین بیماریهای پس از برداشت به شمار میرد استفاده از قارچکشها مهم- ترین مثرترین 1988( )Agrios اما محیط در قارچکش این کنترل راه نگرانیهایی که افزایش زیست بیماری مرد در مقامت میباشد بقایای عامل بیماریزا به قارچکشها جد دارد جستج برای یافتن رشهای کم زیانتر ایمنتر مانند کنترل بیلژیک را افزایش داده است. در میان مجدات همستیز مخمرها به عنان عامل کنترل بسیاری هستند.)Irtwange 2006( زیستی مؤثر دارای اهمیت مخمرها اسپرهای آلرژیزا مایکتکسین یا آنتیبیتیک تلید نمیکنند از این ر کاربرد آنها در کنترل بیمارگرهای گیاهی بدن خطر است )14.)Droby and Chalutz با تجه به یژگیهای فق مخمرها بهعنان یکی از بهترین گزینهها برای به کارگیری در فرایند کنترل نظر گرفته میشند.)Lima et al. 18( زیستی در در این تحقیق تانایی جدایههای مخمر جداسازی شده از ماد غذایی گیاهی در استان کرمانشاه علیه عامل بیماری کپک خاکستری در شرایط آزمایشگاهی بهرش کشت متقابل مرد ارزیابی قرار گرفت. جداسازی مخمرها ماد رشها جهت جداسازی مخمرها از ماد غذایی شامل ترشیجات خیارشر مربا دغ پنیر بافتهای گیاهی خاکهای بکر از نقاط مختلف استان کرمانشاه نمنه برداری به صرت تصادفی صرت گرفت. برای جداسازی مخمرها از نمنههای ماد غذایی از رش س یار Suh et al. ( )2008, Yarrow 18 سری رقت استفاده شد برای نمنههای خاک نیز از.)Suh et al. 2008( تهیه مایه بیمارگر آزمن کنترل زیستی مایه بیمارگر B. cinerea که بیماریزایی آن اثبات شده بد از کلکسین بخش گیاهپزشکی دانشگاه رازی تهیه شد. آزمن کنترل زیستی در قالب طرح کامال تصادفی با رش کشت متقابل عامل بیمارگر جدایههای مخمر صرت گرفت. عامل بیمارگر با فاصله زمانی ساعت 24 زدتر از جدایه مخمر ری محیطکشت عصارهی سیب زمینی دکسترز آگار )PDA( کشت داده شد. هر یک از تیمارهای مخمر دارای سه تکرار بدند. زمانی که رشد تیمار شاهد به محدده خط کشت مشخص شده رسید اقدام به اندازهگیری میزان رشد بیمارگر محاسبه درصد کاهش رشد میسلیم شد برای این منظر از فرمل N=(a-b)/a 100 استفاده شد )در فرمل N: درصد بازدارندگی جدایه مخمر a: میزان رشد قارچ بیمارگر در تیمار شاهد بر حسب سانتیمتر b: میزان رشد قارچ بیمارگر در هر تیمار مخمر( )2005 al..)etebarian et تجزیه تحلیل دادهها با استفاده از نرمافزار 9.1 صرت پذیرفت. شناسایی ملکلی جدایههای مخمری استخراج فزنسازی دی. نا استخراج دی. نا SAS. یا. یا نسخه سللهای مخمر با استفاده از رش حرارتدهی س همکاران )2008( صرت پذیرفت. فزنسازی ناحیه D1/D2 استفاده از آغازگرهای زیراحد بزرگ ریبزمی با )-5 تالی با NL4 )GGTCCGTGTTTCAAGACGG-3 با تالی NL1 )5-GCATATCAATAAGCGGAGGAAAAG-3(.)Fell et al. 2000( صرت پذیرفت )O Donnell 13( مفقیت فزنسازی با راندن محصالت اکنش زنجیره-

3 3 کنترل بیلژیک آفات بیماری های گیاهی درۀ 7 شمارۀ 1 بهار تابستان 1397 ای پلیمراز ری ژل آگارز یک درصد به مدت یک ساعت در 80 ات تعیین گردید. تعیین ترادف در جهت رفت صرت گرفت ترادفهای حاصل از تعیین تالی با استفاده از نرمافزار Bankit به بانک ژن ارسال شماره دسترسی اخذ گردید. برای تایید شناسایی آنالیز فیلژنتیکی جدایهها با استفاده از نرمافزار صرت گرفت. نتایج بحث MEGA6.06 در این مطالعه تعداد کل جدایههای مخمر جداسازی شده 102 عدد بد که 31 جدایه آنها بازیدیمیستی 71 جدایه آسکمیستی بدند. جداسازی مخمرها از سه گره ماد غذایی اندامهای گیاهی خاک صرت گرفت. از ماد غذایی 39 جدایه از اندامهای گیاهی 35 جدایه از خاک 28 جدایه مخمر جداسازی گردید. مخمرهای آسکمیستی بازیدیمیستی با استفاده از آزمن رنگ- آمیزی با دیازینیم بل بی از هم تفکیک شدند. در آزمن ری محیط کشت 25 جدایه مخمر خاصیت بازدارندگی از رشد نشان دادند که با 14 جدایه بازدارندگی بیش از پنج درصد جهت تعیین تالی انتخاب گردیدند. ناحیه تکثیری D1/D2 زیراحد بزرگ ریبزمی برای مخمرهای جداسازی شده از ماد غذایی گیاهان با استفاده از آغازگرهای NL-4 NL-1 تکثیر شد که طل این ناحیه در حدد جفت باز بد. در این بررسی نه گنه متعلق به هشت مخمری با رش ملکلی شناسایی شد که تمام جدایهها پس از شناسایی در بانک ژن ثبت شماره دسترسی آنها اخذ شد )جدل 1 (. گنههای P. Pichia kudriavzevii Meyerozma Galactomyces candidum galeiformis Saccharomyces cerevisiae guilliermondii Zygoascus meyerae از ماد غذایی گنههای Pichia C. Metschnikowia sp. Candida parapsilosis sp. boidinii از گیاهان گنههای M. Lecythophora sp. guilliermondii شدند. C. catenulatea از خاک جداسازی Code of isolates جدل 1. لیست گنههای مخمر شناسایی شده در این پژهش به همراه شماره دسترسی به تالی D1/D2 در بانک ژن Table 1. List of identified yeast species in this study and their accession numbers Accession number KP KP KP KP KP KP KP KP KP KP KP KP KP Similarity Source and location Marshmallow-College of Agriculture Marshmallow-College of Agriculture Pistachio- College of Agriculture Onion-Kermanshah Pepper pickle- Kermanshah Collard pickle-kermanshah Water of pickle-kermanshah Sourness-Songhor Lemon juice-ravansar Lemon juice-kermanshah Uucultivated soil- Sahneh Uucultivated soil- Javanrood Salas Babajani Species Pichia sp. Candida parapsilosis Metschnikowia sp. Candida boidinii Pichia kudriavzevii Pichia galeiformis Galactomyces candidum Meyerozma guilliermondii Saccharomyces cerevisiae Zygoascus meyerae Lecythophora sp. Meyerozma guilliermondii Meyerozma guilliermondii P-2 P-5 P-6 P-10 F-4 F-8 F-9 F-19 F-20 F KP Kerende gharb Candida catenulata 42 آزمن کنترل زیستی در این بررسی پنج جدایه با رشد سریع مانع از پیشری پرگنه بیمارگر در محیط کشت عصاره سیبزمینی دکسترز آگار شدند در هشت جدایه هاله بازدارنده تشکیل نشد )شکل 1(. محققان دریافتند که مخمرهای آنتاگنیست با مکانیسمهایی مثل رقابت برای ماد غذایی فضا میکپارازیتیسم اشغال نیچ اکلژیکی القای مقامت به عامل بیماریزا در گیاه تلید آنزیمهای لیتیک سبب کنترل بیمارگرها میشند 2005(.) Yao and Tian

4 میزان رشد بیمارگر در تیمارهای مختلف )cm( h g ef def fg cde fg bcde bcde bc bcd bcde bcd b a قرایی همکاران: بررسی اثر بیکنترلی مخمرهای آسکمیستی جداسازی شده از منابع طبیعی بر... 4 شکل 1. نتایج آزمن برهمکنش مخمرها با قارچ.B cinerea در تعدادی از مخمرها. )A( تیمار مخمر )B( Galactomyces candidum تیمار مخمر )C( Pichia kudriavzevii تیمار مخمر sp. )D( Lecythophora تیمار مخمر )E( P. galeiformis تیمار مخمر )F( Meyerozma guilliermondi تیمار مخمر )G( C. catenulata تیمار مخمرcerevisiae )H( Saccharomyces تیمار مخمر sp. )I( Pichia شاهد. )در تمام تشتکهای پتری حرف B جایگاه بلک بیمارگر است(. Fig. 2. Results of effect of some yeasts species against on Botrytis cinerea. Galactomyces candidum (A), Pichia kudriavzevii (B), Lecythophora sp. (C), Pichia galeiformis (D), Meyerozma guilliermondi (E), C. catenulate (F), cerevisiae Saccharomyces (G), Pichia sp. (H). B is a control in all Petri dishes جدایه های مخمری به عنان تیمار همراه با شاهد شکل 2.گرهبندی میزان رشد قارچ بیمارگر در تیمار با جدایههای مخمری نسبت به شاهد با استفاده از آزمن دانکن در سطح پنج درصد Fig. 2. The growth of pathogenic fungus in the treatment with yeast species compared to the control using Duncan test at 5%. بر اساس گرهبندی صرت گرفته با استفاده از آزمن دانکن در سطح پنج درصد )شکل 2( بیشترین میزان

5 5 کنترل بیلژیک آفات بیماری های گیاهی درۀ 7 شمارۀ 1 بهار تابستان 1397 تفات نسبت به شاهد در جدایه Galactomyces ( F-9 )candidum با 47/85 مطالعه شاهد با میزان رشد درصد بازدارندگی است. در این 5/26 بازدارندگی صفر درصد در نظر گرفته شد. نمنههای شناسایی شده Pichia در اینن پننژهش سنه نمنن ه شنامل سانتیمتر با P. galeiformis P. kudriavzevii Pichia sp. متعلنننق بنننه اینننن جنننس بدننند میننزان بازدارننندگی از رشنند بیمننارگر ری محنننیط کشنننت بنننهترتینننب 13/72 22/08 6/53 درصنند بننرای آنهننا بنند. در میننان مخمرهننای آنتاگنیسنت مخمرهنای جننس Pichia از جملنه P. P. anomala P. membranaefaciens angusta P. caribbica P. kudriavzevii بنننهعننننان عامل منثر کنتنرل زیسنتی پنس از برداشنت گنزارش شدهاند.)Li et al. 2014( Candida در اینن پنژهش سنه نمننه شنامل C. parapsilosis C. boidinii.c catenulata متعلنق بنه اینن جننس بدننند میننزان بازدارننندگی از رشنند بیمننارگر ری محننیط کشننت بننهترتیننب 25/76 8/49 23/31 درصنند بننرای آنهننا بنند. برخننی از مخمرهننای ایننن جننس ماننند.C oleophila بنهصنرت تجناری جهنت کنترل بیماریهنای پنس از برداشنت تلیند منیشنند. مخمننر.C parapsilosis اثننرات بازدارنننده در مقابننل تمنام فزارینمهنای جندا شنده از ترت گنندم نشنان داده اسننت )2016 al. )Fallah et عنناله بننر ایننن اثن رات آنتاگنیسن تی اینن گنن ه بنر رشند میسننلیم تلیننند آفالتکسنننین تسنننط گننننه گزارش شده است Aspergillus.)Niknejad et al. 2012( Meyerozma در اینننن پنننژهش سنننه نمننننه بنننهعننننان M. guilliermondii شناسننننایی شنننندند کننننه میننننزان بازدارننندگی از رشنند بیمننارگر ری محننیط کشننت گزارشهنای بسنیاری از تاننایی بینکنترلی اینن گننه جد دارد 1989(.)Wilson and Wisniewski Saccharomyces در اینن پنژهش ینک نمننه بنهعننان S. cerevisiae شناسننایی گردینند کننه میننزان بازدارننندگی از رشنند بیمنارگر ری محنیط کشنت 27/45 درصند بند. چنند گننننزارش در مننننرد آنتاگنیسنت قنارچ د سننیه S. cerevisiae بننننهعنننننان B. cinerea در انگنر جند دارد.S cerevisiae فعالیننت آنتاگنیسننتی بننا طیننف گسننترده در شننرایط آزمایشننگاهی در برابننر 10 پنناتژن قننارچی جنندا شننده از خنناک میننه نشننان دادهاند.)Nally et al. 2012( Zygoascus در اینن پننژهش یننک نمنن ه بنهعنن ان Z. meyerae شناسننایی گردینند کننه میننزان بازدارننندگی از رشنند بیمننارگر ری محننیط کشننت 36/80 درصنند بنند. تاکنن از این جننس گننه هنیچ گزارشنی مبننی بنر فعالینت آنتاگنیسنتی جند نندارد. اینن گننه تاننایی تجزیه ترکیبنات لیگنسنللزی تاننایی تلیند اتنانل از این ماد را دارا میباشد.)Lorliam et al. 2014( Lecythophora در این پنژهش ینک نمننه بنهعننان Lecythophora sp. شناسنایی گردیند کنه مینزان بازدارنندگی از رشند بیمنارگر ری محنیط کشنت 31/28 درصند بند. یکنی از رشهننای کنناهش ایننن آلنندگیهننا سننمزدایننی تراشههنای چنب پنیش از شنرا فراینند تلیند کاغنذ اسنت مشنخص شنده کنه تیمنار تراشنه چنبهنا بنا قن ارچهن ایی ماننن د Lecythophora sp. 67 درصندی مناد سنمی شنده اسنت ( باعنک کناهش Wang et al..)15 Metschnikowia در ایننننن پننننژهش یننننک نمنننننه بننننهعنننننان Metschnikowia sp. شناسننایی گردینند کننه میننزان 9/15 7/ / درصننند بنننرای آنهنننا بننند. بازدارننندگی از رشنند بیمننارگر ری محننیط کشننت

6 قرایی همکاران: بررسی اثر بیکنترلی مخمرهای آسکمیستی جداسازی شده از منابع طبیعی بر /72 درصند بند. برخنی از مخمرهنای اینن جننس مانند.M fructicola بنهصنرت تجناری جهنت کنتنرل بیماریهای پس از برداشت تلید میشند. Galactomyces در اینن پنژهش ینک نمننه بنهعننان.G candidum شناسننایی گردینند کننه میننزان بازدارننندگی از رشنند بیمنارگر ری محنیط کشنت 47/85 درصند بند. بنرای این گنه یک منرد تاننایی کنتنرل بیمناریهنای پنس از برداشننت در شننرایط آزمایشننگاهی گننزارش شننده آنااالیز فیلااژنی مخمرهااای آسکمیسااتی باار اساس ناحیه D1/D2 درخننت فیلننژنتیکی ترسننیم شننده بننرای مخمرهننای آسکمیسننتی شناسننایی شننده نشننان داد کننه ایننن گنههنا بنا ارزش درسنتنمنایی 100 درصند همنراه بنا گنههای بهدسنت آمنده از باننک ژن در ینک تبنار قنرار منیگیرنند. گننههنای Rhodosporidium toruloides Rhodotorula mucilaginosa بننهعنننان گننره خنارجی انتخناب شندند )شنکل 3(. تنالیینابی ناحینه D1/D2 بنهطنر کلنی ینک ابنزار پذیرفتنه شنده بنرای تعیین هیت گنههنا بنهینژه بنرای مخمرهنای ابسنته بننه شنناخه آسننکمیکتا مننیباشنند ( Ramos et al..)2005 است 2002(.)Cook شکل 3( درخت فیلژنیک ترسیم شده با استفاده از رش الحاق مجار بر اساس تالی ناحیه D1/D2 زیراحد بزرگ دی.ان.ای. ریبزمی با استفاده از نرمافزار.MEGA 6 تعداد تکرار 1000 بار بد گنه Rhodosporidium toruloides Rhodotorula mucilaginosa بهعنان گره خارجی انتخاب شدند. مثلکها نشان دهنده جدایههای ایرانی است. مقیاس نشان دهنده 0.02 درصد جایگزینی. شکلها نمایانگر جدایههای ایران است. Fig. 3. Neighbor joining phylogram generated in Mega 6 from the alignment of D1/D2 region of large subunit of the yeast species, using the Kimura two parameter model with complete deletion gap handling and 1,000-replication bootstrapping. The shapes refer to isolates from Iran. Rhodosporidium toruloides is selected as out group نتیجهگیری کلی اینن تحقینق شنرعی بنرای جداسنازی مخمرهنای بنا تاننایی کنتنرل زیسنتی در اسنتان کرمانشناه بند از نمنههنای شناسنایی شنده تعنداد کمنی ( سنه نمننه( د ر م ناب ع بن ه ع نن ا ن ع امنل ک ن تن ر ل زی سن تی بنا ت اننایی بنناال معرفننی شنندهاننند کننه شننامل گنننههننای S.

7 7 کنترل بیلژیک آفات بیماری های گیاهی درۀ 7 شمارۀ 1 بهار تابستان 1397 P. M. guilliermondii cerevisiae بدننند. پیشنننهاد مننیشنند تحقیننق جهنت بررسنی تاننایی اینن گننههنا ری مینههنا آزمایشهای مزرعهای استفاده شد. kudriavzevii REFERENCES Agrios GN (1988) Plant pathology (3rd ed.). Academic Press, Inc: San Diego. Chan, Z. and Tian, S (2005) Interaction of antagonistic yeasts against postharvest pathogens of apple fruit and possible mode of action. Postharvest Biology and Technology 36: Cook DWM (2002) A laboratory simulation for vectoring of Trichosporon pullulans by conidia of Botrytis cinerea. Phytopathology 92: Droby S, Chalutz E (14) Mode of action of biocontrol agents of postharvest disease. In: Wilson CL, Wisniewski ME (Eds.), Biological control of postharvest diseases of fruits and vegetables-theory and practice. CRC Press, Boca Raton, FL, pp Etebarian HR, Sholberg PL, Eastwell KC, Sayler RJ (2005) Biological control of apple blue mold with Pseudomonas fluorescens. Canadian Journal of Microbiology 51: Fallah B, Zaini F, Daei Ghazvini R, Kachuei R, Kordbacheh P., Safari M, Mahmoudi S (2016) The antagonistic effects of Candida parapsilosis on the growth of Fusarium species and fumonisin production. Current Medical Mycology 2(1): 1-6. Fell JW, Boekhout T, Fonseca A, Scorzetti G, Statzell-Tallman A (2000) Biodiversity and systematics of basidiomycetous yeasts as determined by large-subunit rdna D1/D2 domain sequence analysis. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 50: Irtwange SV (2006) Application of biological control agents in pre- and postharvest operations. International Commission of Agricultural Engineering; 8: Li C, Zhang H, Yang Q, Komla MG, Zhang X, Zhu S (2014) Ascorbic acid enhances oxidative stress tolerance and biological control efficacy of Pichia caribbica against postharvest blue mold decay of apples. Journal of Agriculture and Food Chemistry 62: Lima G, De-Curtis F, Castoria R, Dem-Cicco V (18) Activity of the yeasts Cryptococcus laurentii and Rhodotorula glutinis against post-harvest rots on different fruits. Biocontrol Science Technology 8: Lorliam W, Suwanna S, Akaracharanya A, Tanasupawat S (2014) First determination of ethanol production and xylose reductase gene of Zygoascus meyerae E23. Chiang Mai Journal of Science 41(1): Nally MC, Pesce VM, Maturano YP, Munoz CJ, Combina M, Toro ME, Figueroa CLI, Vazquez F (2012) Biocontrol of Botrytis cinerea in table grapes by non-pathogenic indigenous Saccharomyces cerevisiae yeasts isolated from viticultural environments in Argentina. Postharvest Biology and Technology Niknejad F, Zaini F, Faramarzi M, Amini M, Kordbacheh P, Mahmoudi M (2012) Candida parapsilosis as a potent biocontrol agent against growth and aflatoxin production by Aspergillus species. Iranian Journal of Public Health. 41(10): O Donnell k (13) Fusarium and its near relatives. In the fungal holomorph: mitotic and pleomorphic speciation in fungal systematics, reynolds D. R., and Taylor J.W. (eds). CAB International: Wallingford, UK Ramos J, Rosa C, Carvalho E, Leoncini O, Valente P (2005) Heteroduplex mobility assay of the 26S rdna D1/D2 region for differentiation of clinically relevant Candida species. Antonie van Leeuwenhoek Suh SO, Zhang N, Nguyen N, Gross S, Blackwell M (2008) Lab manual for yeast study. Mycology lab Louisiana State University 37 p. Wang Z, Chen T, Gao Y, Breuil C, Hiratsuka Y (15) Biological Degradation of Resin Acids in Wood Chips by Wood-Inhabiting Fungi. Applied And Environmental Microbiology 61: Wilson CL, Wisniewski ME (1989) Biological control of postharvest diseases of fruits and vegetables: An emerging technology. Annual Review of Phytopathology 27: Yao HJ, Tian SP (2005) Effect of biocontrol agent methyl jasmonate on postharvest diseases of peach fruit and the possible mechanisms involved. Applied Microbiology 98: Yarrow D (18) Methods for the isolation, maintenance and identification of yeasts, pp: In: Kurtzman C.P, Fell J. W (eds.) The yeasts a taxonomic study (4nd). Elsevier. Amsterdam.